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addgene新品速递|靶向中间神经元的增强子 - AAV,精准定位脑细胞类型新工具!

新品速递

在脑科学研究中,把基因表达精准 “投递” 到大脑特定细胞类型,是实验和治疗研究成功的关键,但是在实际操作中却颇具难度。而近期 Gord Fishell 实验室及其合作单位带来了新解法 ——新型增强子 - 腺相关病毒(Enhancer-AAVs)载体,可精准靶向皮层和纹状体特定类型中间神经元,相关研究成果已于 2025 年发表,且十余种相关库存病毒制剂已正式上线,为脑科学研究提供了高效的新工具!

1、核心亮点:精准靶向,覆盖主要神经元类型

此次推出的增强子 - AAV 构建体,均采用系统性 PHP.eB 衣壳(血清型),在七种特异性增强子的调控下,可表达光遗传激活因子通道视紫红质 - 2,或荧光报告基因 dTomato。

其靶向性覆盖了所有四类主要的 γ- 氨基丁酸能中间神经元(分别由小清蛋白 PV、生长抑素 SST、血管活性肠肽 VIP、溶酶体相关膜蛋白 5 LAMP5 标记),同时也能靶向胆碱能神经元(胆碱乙酰转移酶 ChAT),研究人员已在小鼠、非人灵长类动物及人类组织中,验证了这些工具的特异性,可靠性拉满!

2、实测数据:PV 中间神经元靶向效果超亮眼

以针对小鼠 PV 中间神经元的 BiPVe3 增强子 - AAV 为例,来看一组实打实的验证数据:

图A:经眼眶后注射 AAV 4 周后,在小鼠初级体感皮层(S1)中,BiPVe3 增强子调控的 dTomato 报告基因与小清蛋白(PV)免疫染色实现高效共定位;图中标注了皮层的层级(L1-6)及比例尺(100 μm)

图B:特异性百分比统计图:BiPVe3-dTomato阳性细胞与PV阳性细胞占所有BiPVe3-dTom细胞的百分比。数据显示,皮质L2-6层中该载体对PV中间神经元的特异性约为82%。

图C:表达BiPVe3-dTomato的生物素标记细胞的共聚焦图像:图中呈现典型的PV篮状细胞形态。(Adapted from Furlanis, Dai, Leyva Garcia et al. 2024 bioRxiv, under a CC-BY-NC-ND 4.0 International license.)

3、背景补充:脑计划工具库项目成果

值得一提的是,这些质粒属于 “脑计划”(BRAIN Initiative Armamentarium Collection) 工具库项目成果,该项目是全球重大合作计划,核心目标就是开发研究不同脑细胞类型的优质分子工具,这也让此次的增强子 - AAV 工具更具权威性和实用性。

更多期待:后续产品持续更新

目前已有十余种增强子 - AAV 构建体作为库存病毒制剂提供,研究人员透露,更多针对中间神经元的构建体及其他血清型,将于今年晚些时候推出,脑科学研究的工具库还将持续扩容,敬请关注!

参考文献

[1] Furlanis, E., Dai, M., Leyva Garcia, B., Tran, T., … Dimidschstein, J., Fishell, G., Wang, Y. (2024). An enhancer-AAV toolbox to target and manipulate distinct interneuron subtypes. Neuron, 113(10), 1525–1547.e15. https://doi.org/10.1016/j.neuron.2025.05.002.  

bioRxiv preprint: https://doi.org/10.1101/2024.07.17.603924.

1.本文中涉及的病毒制剂产品链接

https://www.addgene.org/search/catalog/viral-preps/?q=An+enhancer-AAV+toolbox+to+target+and+manipulate+distinct+interneuron+subtypes+Furlanis+Fishell

2.本文中涉及的质粒产品链接

https://www.addgene.org/browse/article/28243841/

3.Addgene Blog原文链接

https://blog.addgene.org/hot-plasmids-spring-2025?_gl=1*14huj2v*_gcl_au*MTk0MTU1MTU1OC4xNzY2OTY5Nzgx*_ga*MTc4NjUyMTA0MC4xNjYwMDE3MjA0*_ga_5SC3L963MZ*czE3NzA4NzI1NDkkbzU3MiRnMSR0MTc3MDg3MjY2NyRqNTYkbDAkaDA.

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